工作常用生化分析儀的檢測方式經(jīng)驗分享
作者:shenghuafenxiyi 閱讀量:次 發(fā)表時間:2017-07-24 16:14
工作常用生化分析儀的檢測方式經(jīng)驗分享
生化分析儀是用于檢測肝功能、腎功能、血糖血脂、心肌酶譜等項目的醫(yī)療設(shè)備,那么生化儀的檢測方式有哪些呢?
答案主要有:終點法、兩點法、速率法(又稱動力學(xué)法)。
1、兩點終點法:
在被測物反應(yīng)或指示反應(yīng)尚未開始時,檢測第一個吸光度,在反應(yīng)到達終點時,再測出第二個吸光度,用此兩點之差計算檢測結(jié)果,稱為兩點終點法(two point end assay)。該法能有效地消除樣本基質(zhì)(樣本空白)造成的干擾。
2、終點法:
被測物質(zhì)通過反應(yīng)過程完全轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物,即達到反應(yīng)終點(實際是處于平衡狀態(tài)),根據(jù)終點吸光度的大小求出被測物質(zhì)的濃度,稱為終點法。分析儀在反應(yīng)終點連續(xù)測幾個值進行處理后求出平均值,扣除空白后計算檢測結(jié)果(適于反應(yīng)簡單、無干擾的單試劑檢測項目)。反應(yīng)應(yīng)在規(guī)定時間內(nèi)達到平衡,反應(yīng)速度慢的原因有:酶量不足或酶的質(zhì)量不好,或處于非佳反應(yīng)條件。
3、速率法:
又稱連續(xù)監(jiān)測法、動力學(xué)法,是在測定酶活性時連續(xù)測定時間-吸光度曲線中線性期的吸光度值的變化率,并以此線性期單位時間的吸光度值ΔA/min計算檢測結(jié)果。設(shè)定參數(shù)應(yīng)與實際延遲期、線性期相符,否則應(yīng)予修改;反應(yīng)曲線斜率過低的原因:試劑底物濃度不足,輔酶(或指示酶)的酶量不足或質(zhì)量不好,反應(yīng)條件不佳。
4、固定時間法:
在時間-吸光度曲線上選擇兩個側(cè)光點,此兩點既非反應(yīng)初始值也非終點值,用兩點之差計算檢測結(jié)果,稱固定時間法(fixed time assay)。主要用于克服快速反應(yīng)干擾物和慢反應(yīng)干擾物對檢測結(jié)果的影響。例如:苦味酸法測定肌酐,快反應(yīng)(前30s)干擾物是:微生物、丙酮酸及乙酰乙酸等,慢反應(yīng)(80s后)干擾物是:蛋白質(zhì)。在時間-吸光度曲線的線性段,也可以采用連續(xù)監(jiān)測法測定肌酐。
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